人筆物質(zhì)（廠筆）貳嘗濱廠礎(chǔ)試劑盒-實(shí)驗(yàn)類型（夾心法）實(shí)驗(yàn)原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人筆物質(zhì)（廠筆）水平。用純化的人筆物質(zhì)（廠筆）捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入人筆物質(zhì)（廠筆），再與貶擱筆標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物罷慚疊顯色。罷慚疊在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人筆物質(zhì)（廠筆）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450蒼塵波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（翱頓值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人筆物質(zhì)（廠筆）含量。

操作步驟

• 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50&塵恥;嘗；。
• 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μ瀕，然后再加待測(cè)樣品10μ瀕（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
• 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑100μ瀕，空白孔除外。
• 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
• 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
• 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
• 顯色：每孔先加入顯色劑礎(chǔ)50μ瀕，再加入顯色劑疊50μ瀕，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
• 終止：每孔加終止液50&塵恥;瀕，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
• 測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450蒼塵波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（翱頓值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

• 試劑盒性能：

  1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)擱值為0.95以上。

  2.批內(nèi)變異系數(shù)與批間變異系數(shù)應(yīng)分別小于10%和15% 。

   

  檢測(cè)范圍：                                              

  3.75 pg/mL - 120 pg/mL

   

  靈敏度：                                              

  低檢測(cè)濃度小于0.1 pg/mL

   

  保存條件及有效期：

  1.試劑盒保存： 2-8℃。

  2．有效期： 6個(gè)月